毒死蜱及TCP對(duì)生物DNA的損傷和土壤微生物多樣性的影響.pdf

1、毒死蜱(Chlorpyrifos)是一種常用的有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑，其化學(xué)名稱為：O，O-二乙基-O-(3，5，6-三氯-2-吡啶基)硫代磷酸酯，主要用于農(nóng)作物害蟲(chóng)和家庭衛(wèi)生害蟲(chóng)的防治。毒死蜱作為高毒農(nóng)藥甲胺磷、甲基對(duì)硫磷等替代品被廣泛使用，現(xiàn)已成為世界上應(yīng)用最廣泛的殺蟲(chóng)劑之一。近年來(lái)，毒死蜱的毒性效應(yīng)備受關(guān)注，許多國(guó)家已經(jīng)認(rèn)識(shí)到毒死蜱的危害，并逐步限制甚至禁止使用毒死蜱。毒死蜱在環(huán)境中的主要降解產(chǎn)物為T(mén)CP(3，5，6-三氯-2-吡啶酚)，毒

2、死蜱的廣泛使用導(dǎo)致環(huán)境中存在一定量的TCP。TCP較毒死蜱水溶性大、移動(dòng)性強(qiáng)，從而更容易滲入地下，污染水體和土壤，對(duì)環(huán)境生物造成危害。本研究采分子生物學(xué)技術(shù)，研究了毒死蜱及其降解產(chǎn)物TCP對(duì)蠶豆、蚯蚓和土壤微生物的毒性影響，為了解和認(rèn)識(shí)毒死蜱及降解產(chǎn)物TCP對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的影響提供依據(jù)。主要研究結(jié)果如下： 1、微核實(shí)驗(yàn)：將蠶豆次生根的根尖分別用0.01、0.1、1.0、10.0 mg·L-1毒死蜱溶液和0.01、0.1、1.0、5.

3、0 mg·L-1TCP溶液處理12、24、36、48h，測(cè)定蠶豆根尖細(xì)胞微核率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，一定劑量的毒死蜱和TCP可誘導(dǎo)蠶豆根尖細(xì)胞產(chǎn)生微核，這說(shuō)明毒死蜱和TCP對(duì)蠶豆根尖細(xì)胞可造成一定程度的遺傳損害；通過(guò)比較毒死蜱和TCP誘導(dǎo)蠶豆根尖細(xì)胞產(chǎn)生的微核率，可知毒死蜱降解產(chǎn)物TCP對(duì)蠶豆具有更大的遺傳毒性。 2、單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)(SCGE)：在人工土中添加毒死蜱，使得毒死蜱的終濃度為0.01、0.1、1.0和10.0mg·kg

4、-1，另在人工土中添加TCP，使得TCP的終濃度為0.01、0.1、1.0和5.0mg·kg-1，然后將赤子愛(ài)勝蚓放入人工土中染毒7、14、21、28d，通過(guò)單細(xì)胞電泳檢測(cè)了毒死蜱及TCP對(duì)蚯蚓體腔細(xì)胞DNA的損傷。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：經(jīng)不同濃度毒死蜱和TCP處理均可造成蚯蚓細(xì)胞DNA損傷，而且隨著濃度的增加和時(shí)間的延長(zhǎng)，彗星拖尾長(zhǎng)度、Olive尾矩的值呈上升的趨勢(shì)，這說(shuō)明毒死蜱、TCP可對(duì)蚯蚓體腔細(xì)胞DNA造成損傷，損傷程度與毒死蜱、TCP

5、的濃度、處理時(shí)間存在劑量-效應(yīng)和時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系。通過(guò)比較相同條件下毒死蜱與TCP對(duì)蚯蚓體腔細(xì)胞DNA所造成影響，可知毒死蜱降解為T(mén)CP后毒性加大。 3、變性梯度凝膠電泳實(shí)驗(yàn)(DGGE)：以山東農(nóng)業(yè)大學(xué)南校區(qū)試驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)土壤為材料，在室內(nèi)培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，運(yùn)用變性梯度凝膠電泳技術(shù)，研究了0.01、0.1、1.0、10.0mg·kg-1的毒死蜱和0.01、0.1、1.0、5.0mg·kg-1的TCP對(duì)土壤微生物多樣性的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，毒