放線菌來源的乙酰膽堿酯酶抑制劑的篩選.pdf

1、根據(jù)膽堿酯酶對乙酰膽堿和丁酰膽堿的選擇性水解作用可分為乙酰膽堿酯酶和丁酰膽堿酯酶.該實驗運用改良的ELLMEN氏反應,建立針對乙酰膽堿酯酶抑制劑的高通量篩選方法.從2000余株放線菌中篩選出35株陽性菌株(對乙酰膽堿酯酶的抑制率大于5﹪),其中數(shù)株對乙酰膽堿酯酶具有選擇性的抑制作用(對乙酰膽堿酯酶的抑制率大于丁酰膽堿酯酶).從中挑選11株陽性菌株進行固體發(fā)酵,不改變其發(fā)酵條件,目的是進行活性的重現(xiàn)性發(fā)酵.該實驗運用多種不同碳源和氮源的培

2、養(yǎng)基對陽性菌株的液體發(fā)酵條件進行了研究.發(fā)現(xiàn)陽性菌株的較佳生長條件,尤其對其代謝產(chǎn)物的活性與發(fā)酵時間的關(guān)系進行了較詳細的研究.對培養(yǎng)基的優(yōu)化進行的研究表明,(NH4)2SO4會抑制活性物質(zhì)的產(chǎn)生.研究結(jié)果表明,目標菌株發(fā)酵物中的活性成份具有很好的酯溶性,且因為其分子量小,容易透過血腦屏障,作用于中樞膽堿能神經(jīng)系統(tǒng).該實驗還須對活性物質(zhì)進行進一步的純化,取得活性物質(zhì)的單體,進行結(jié)構(gòu)與活性及其選擇性抑制作用的研究,通過對其進行結(jié)構(gòu)改造與修飾