放線菌來(lái)源的乙酰膽堿酯酶抑制劑的篩選.pdf

1、根據(jù)膽堿酯酶對(duì)乙酰膽堿和丁酰膽堿的選擇性水解作用可分為乙酰膽堿酯酶和丁酰膽堿酯酶.該實(shí)驗(yàn)運(yùn)用改良的ELLMEN氏反應(yīng),建立針對(duì)乙酰膽堿酯酶抑制劑的高通量篩選方法.從2000余株放線菌中篩選出35株陽(yáng)性菌株(對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制率大于5﹪),其中數(shù)株對(duì)乙酰膽堿酯酶具有選擇性的抑制作用(對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制率大于丁酰膽堿酯酶).從中挑選11株陽(yáng)性菌株進(jìn)行固體發(fā)酵,不改變其發(fā)酵條件,目的是進(jìn)行活性的重現(xiàn)性發(fā)酵.該實(shí)驗(yàn)運(yùn)用多種不同碳源和氮源的培

2、養(yǎng)基對(duì)陽(yáng)性菌株的液體發(fā)酵條件進(jìn)行了研究.發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性菌株的較佳生長(zhǎng)條件,尤其對(duì)其代謝產(chǎn)物的活性與發(fā)酵時(shí)間的關(guān)系進(jìn)行了較詳細(xì)的研究.對(duì)培養(yǎng)基的優(yōu)化進(jìn)行的研究表明,(NH4)2SO4會(huì)抑制活性物質(zhì)的產(chǎn)生.研究結(jié)果表明,目標(biāo)菌株發(fā)酵物中的活性成份具有很好的酯溶性,且因?yàn)槠浞肿恿啃?容易透過(guò)血腦屏障,作用于中樞膽堿能神經(jīng)系統(tǒng).該實(shí)驗(yàn)還須對(duì)活性物質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步的純化,取得活性物質(zhì)的單體,進(jìn)行結(jié)構(gòu)與活性及其選擇性抑制作用的研究,通過(guò)對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造與修飾