水稻雄性不育突變體Osms2和Osms3的遺傳與定位分析.pdf

1、為了研究水稻花粉發(fā)育的機(jī)理，，本文利用60Coγ射線(xiàn)誘變的方法構(gòu)建水稻雄性不育突變體庫(kù)，在回交后代中獲得兩個(gè)水稻隱性單基因控制的突變?nèi)后wOsms2和Osms3。 對(duì)Osms2進(jìn)行組織切片觀察發(fā)現(xiàn)，在小孢子四分體以前小孢子及藥室各層壁都發(fā)育正常，但隨后小孢子變形降解不能發(fā)育成花粉粒.而醋解實(shí)驗(yàn)也顯示在四分體時(shí)期小孢子外壁發(fā)育不正常，最后導(dǎo)致小孢子降解不能形成成熟的花粉粒。Osms2與秈稻廣陸矮雜交，自交獲得F2代分離群體進(jìn)行遺傳定

2、位.通過(guò)遺傳定位方法，首先將突變基因座位定位在水稻第3染色體InDel標(biāo)記0S302和SJ302之間.為了對(duì)OsMS2座位進(jìn)行精細(xì)定位，我們?cè)?S302和SJ302之間發(fā)展了6對(duì)有多態(tài)性InDel分子標(biāo)記，將該基因座位定位在CL6-4和CL7-4之間，距離二者分別為0.1cM和0.04cM，物理距離為100kb左右。分析這個(gè)范圍共有13個(gè)基因，其中的一個(gè)類(lèi)似MS2基因與擬南芥雄性不育基因MS2同源，測(cè)序發(fā)現(xiàn)，該基因的第八個(gè)外顯子有一個(gè)堿

3、基缺失，導(dǎo)致發(fā)生移碼突變。初步確定OsMS2即為候選基因。 Osms3突變體可進(jìn)行正常減數(shù)分裂，形成二分體和四分體，但突變體的花粉壁發(fā)育與野生型相比，其絨氈層出現(xiàn)過(guò)早的液泡化和降解異常的表型。發(fā)育至小孢子晚期，突變體的小孢子數(shù)目變少，且無(wú)淀粉的積累，導(dǎo)致了不能形成正常的花粉粒。為克隆編碼OsMS3的基因，用Osms3與秈稻廣陸矮4號(hào)雜交產(chǎn)生的F2代群體，對(duì)OsMS3位點(diǎn)進(jìn)行遺傳定位，發(fā)現(xiàn)OsMS3與位于9號(hào)染色體上的Indel分