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文檔簡介
1、目的:測定大鼠單側(cè)輸尿管部分梗阻后輸尿管平滑肌細(xì)胞中M3受體mRNA的轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達(dá)水平改變的規(guī)律,以探討單側(cè)輸尿管部分梗阻后輸尿管平滑肌細(xì)胞中M3受體的作用。
方法:Wistar雄性大鼠80只,隨機(jī)分為4組:8周PUUO組20只;16周PUUO組20只;在實(shí)驗(yàn)的相同時間段設(shè)立對照組各20只。PUUO組采用把大鼠輸尿管左側(cè)上1\2段埋入腰大肌并簡單縫合肌肉邊緣做成單側(cè)輸尿管部分梗阻的大鼠模型,對照組則只游離左側(cè)輸尿管以
2、給予相同的刺激和生理環(huán)境。模型成功后于8周和16周時處死大鼠分離輸尿管;分別用RT-PCR檢測輸尿管平滑肌M3受體mRNA的含量;Westem-blot檢測輸尿管平滑肌M3受體蛋白的含量。各組間數(shù)據(jù)的比較采用統(tǒng)計學(xué)中的單因素方差分析方法處理,以α=0.05為標(biāo)準(zhǔn)。
結(jié)果:RT-PCR結(jié)果示:實(shí)驗(yàn)組大鼠M3受體mRNA的表達(dá)在輸尿管不完全梗阻的8周時高于正常對照組,分別為:55.16±3.94VS36.48±3.87(P<0
3、.05);16周時低于對照組19.37±3.70VS37.39±3.65(P<0.05),8周實(shí)驗(yàn)組高于16周實(shí)驗(yàn)組(P<0.05)。Westem-blot結(jié)果示:實(shí)驗(yàn)組大鼠M3受體蛋白的表達(dá)在不完全梗阻的8周時高于對照組,27.13±1.77VS21.36±2.69(P<0.05);16周時低于對照組19.41±1.37VS23.43±1.58(P<0.05)。8周對照組與16周對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
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