非小細(xì)胞肺癌治療的基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的：以鉑類藥物為主的化療是晚期非小細(xì)胞肺癌最主要的化療方案，而遺傳因素對(duì)藥物的療效是重要的決定因素。已有研究表明：著色性干皮病基因C（xeroderma pigmentosum group C，XPC）是重要的DNA損傷修復(fù)因子，在腫瘤發(fā)生及預(yù)后中起著重要作用，本研究目的是探討晚期非小細(xì)胞肺癌患者XPC基因Ala499Val和Lys939Gln的多態(tài)性與鉑類藥物化療為主的敏感性的關(guān)系。
　　 方法：選擇第一次接受鉑類治療的96

2、例晚期非小細(xì)胞肺癌患者，從患者外周血中提取DNA，用三維聚丙烯酰胺凝膠為基礎(chǔ)的DNA微陣列基因芯片檢測(cè)方法測(cè)定患者血液中XPC的多態(tài)性。用logistic回歸模型分析遺傳多態(tài)性與臨床療效的關(guān)系。
　　 結(jié)果：在Ⅲ期患者中，XPC-Lys939Gln的基因型分布在有效（完全緩解+部分緩解）和無(wú)效（穩(wěn)定+疾病進(jìn)展）組之間有顯著差異（P=0.022）。而且logistic回歸顯示：雜合子A/C基因型攜帶者比野生型A/A基因型攜帶者化療

3、療效更差（OR，0.074；95％CI，0.008-0.704；P=0.023）。但是XPC-Ala499Val多態(tài)性與鉑類為主的化療敏感性無(wú)關(guān)。
　　 結(jié)論：Ⅲ期患者的XPC-Lys939Gln的多態(tài)性與化療敏感性有關(guān)，而且XPC-Lys939Gln的多態(tài)性對(duì)晚期NSCLC（尤其是Ⅲ期）患者鉑類藥物為主的化療反應(yīng)可能是一個(gè)預(yù)測(cè)標(biāo)志物。DNA微陣列芯片檢測(cè)方法準(zhǔn)確、高通量且廉價(jià)，適合大樣本的SNP分型。
　　 目的：藤黃

4、酸（gambogic acid，GA）是藤黃的重要活性成分之一。但GA抗腫瘤作用的確切機(jī)制還不十分清楚。本研究的目的是探討GA對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（transferrin receptors，TfR）不同表達(dá)水平的人非小細(xì)胞肺癌（non-small-cell lungcancer，NSCLC）細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制、誘導(dǎo)凋亡作用，旨在進(jìn)一步研究GA誘導(dǎo)NSCLC細(xì)胞凋亡的作用與其細(xì)胞表面TFR表達(dá)水平的關(guān)系以及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制。
　　

5、 方法：我們用肺腺癌SPC-A1細(xì)胞及肺鱗癌SK-MES-1細(xì)胞進(jìn)行體外研究。采用改良四甲基偶氮唑鹽比色法（MTT）、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)GA對(duì)不同NSCLC細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制及細(xì)胞凋亡作用；Western-blotting法檢測(cè)不同濃度GA對(duì)兩種NSCLC細(xì)胞凋亡蛋白酶Caspase2、Caspase9、Caspase10、促凋亡蛋白Bax及P53蛋白表達(dá)的變化；采用免疫組化法測(cè)定細(xì)胞表面TfR的表達(dá)；用同位素標(biāo)記法測(cè)定兩種NSCLC細(xì)胞對(duì)GA

6、的攝取活性。
　　 結(jié)果：SPC-A1細(xì)胞表面TfR的表達(dá)強(qiáng)于SK-MES-1細(xì)胞；GA對(duì)兩組肺癌細(xì)胞有強(qiáng)大的生長(zhǎng)抑制及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用，相同GA濃度下細(xì)胞表面TfR表達(dá)強(qiáng)的SPC-A1細(xì)胞對(duì)GA誘導(dǎo)凋亡的敏感性高；SPC-A1細(xì)胞對(duì)GA的攝取活性強(qiáng)于SK-MES-1細(xì)胞，且進(jìn)入肺癌細(xì)胞內(nèi)的量具有時(shí)間依賴性，間接證明了TfR和GA為一對(duì)配體。凋亡起始酶Caspase2、Caspase9、Caspase10及促凋亡蛋白Bax、P5