泌乳相關激素對奶牛泌乳性能的影響及調控機制研究.pdf

1、我國乳品業(yè)發(fā)展迅猛，成績斐然，尤其通過優(yōu)化飼養(yǎng)管理等方法，奶牛產奶量顯著提高。然而，如何延長奶牛的泌乳周期、提高乳品品質以及降低乳房炎發(fā)生率，成為我國奶業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展亟待解決的問題。先前的研究主要集中在如何提高產奶量或單一改善乳品質等方面，而泌乳相關激素、擠奶頻率以及乳汁積滯對奶牛泌乳周期中催乳素分泌的影響及其調控機制的研究較少。本研究以泌乳中期荷斯坦奶牛為研究對象，通過注射多潘立酮、雌激素、生長激素和喹高利特四種激素及改變擠奶頻率、

2、乳汁積滯的方法，采用放射免疫技術法、酶標免疫吸附試驗法、實時熒光定量PCR(Quantitative Real Time PCR，qRT-PCR)和Western blotting技術手段，檢測奶牛產奶量、乳汁成分和泌乳相關激素分泌及基因表達的變化，研究奶牛體內催乳素的變化及其與泌乳相關信號通路的關系，揭示奶牛泌乳及維持泌乳的機制，為提高奶牛泌乳性能，保證奶牛的健康，提高奶牛的產奶量和牛奶質量奠定理論基礎。其結果如下:
　　研究多

3、潘立酮聯(lián)合不同擠奶頻率對產奶量、乳汁成分和泌乳相關激素及基因的影響，結果表明，擠奶頻率為1次/天時奶牛產奶量顯著下降(P＜0.05)，而在擠奶頻率為3次/天時，乳脂率(P＜0.05)和乳蛋白(P＜0.05)的含量顯著降低。注射多潘立酮(300 mg/10mL)后對奶牛產奶量無顯著影響(P＞0.10)，但可導致血清中催乳素(PRL)含量極顯著升高(P＜0.01)，而擠奶頻率為1次/天時，乳汁中PRL含量極顯著高于擠奶頻率為3次/天(P＜0

4、.01)。與擠奶頻率為3次/天的奶牛相比，擠奶頻率為1次/天的奶牛乳脂中催乳素受體基因PRLRL(P＜0.05)和PRLRS(P＜0.05)、乳蛋白關鍵基因CSN2(P＜0.05) mRNA表達量均顯著降低。
　　當注射17β-雌二醇(2.5 mg/d)時，與對照組相比，奶牛產奶量極顯著降低(P＜0.01)，乳汁中乳脂率呈升高的趨勢(P=0.08)，乳蛋白和乳糖的含量極顯著升高(P＜0.01)，血清中PRL的含量顯著升高(P＜0.

5、05)，乳汁中PRL的含量具有升高的趨勢(P=0.10)。同時，處理組血漿中的IGF-1濃度極顯著升高(P＜0.01)。血清中Cortisol濃度具有升高的趨勢(P=0.07)。與對照組相比，雌激素注射組乳腺組織中Bcl-2基因的表達量顯著下降(P＜0.05)，BAX/Bcl-2比率顯著升高(P＜0.05);乳脂中PRLRS基因的表達量呈下降趨勢(P=0.07)。Western blotting法檢測乳腺組織催乳素受體蛋白的表達，與對照

6、組相比，注射雌激素對PRLRL和PRLRS蛋白的表達水平無顯著差異(P＞0.10)。
　　生長激素對產奶量具有明顯的促進作用(P＜0.01)。乳汁中的乳脂率顯著升高(P＜0.05)，乳蛋白質的含量呈降低的趨勢(P=0.09)。在注射生長激素(25 mg/d)的第8天，與對照組相比，注射生長激素顯著提高基礎PRL的含量(P＜0.05)，催乳素釋放量之和呈降低的趨勢(P=0.08)。而在第14天，生長激素組的基礎PRL含量呈降低的趨勢

7、(P=0.06)。生長激素注射組血漿中的IGF-1和GH濃度極顯著升高(P＜0.01)，而血清中Cortisol濃度無顯著差異(P＞0.10)。生長激素可促進乳蛋白相關基因的表達，LALBA和CSN2的mRNA表達顯著升高(P＜0.05)，PRLRL mRNA的表達量升高(P＜0.05)。
　　當注射喹高利特(1 mg/d，D1～D14)后，與對照組相比，產奶量極顯著下降(P＜0.01)，乳蛋白含量顯著升高(P＜0.05)，血清中

8、的PRL含量隨著時間的變化極顯著降低(P＜0.01)。注射多潘立酮階段(300 mg/10mL，D15～D35)和試驗后階段(D36～D49)，血清和乳汁中的PRL極顯著升高(P＜0.01)，而與對照組相比，血清中PRL含量在注射多潘立酮階段(P＞0.10)和試驗后階段(P＞0.10)差異不顯著。在試驗后階段(D36～D49)，注射喹高利特組奶牛的產奶量顯著升高(P＜0.05)，乳脂產量極顯著升高(P＜0.01)，乳蛋白的產量(P=0.

9、09)以及乳糖的產量(P=0.06)均呈升高的趨勢。喹高利特注射組的能量校正乳(ECM)顯著升高(P＜0.05)。注射喹高利特后，與對照組相比，注射組乳脂中Bcl-2基因的表達量顯著下降(P＜0.05)，BAX/Bcl-2比率顯著升高(P＜0.05);乳脂中PRLRS基因的表達量顯著下降(P＜0.05)，其他泌乳相關基因的表達含量無顯著差異(P＞0.10)。
　　乳汁積滯24 h后，乳脂率極顯著升高(P＜0.01)。在乳汁積滯的試

10、驗后期(48 h～60 h)，乳脂率(P＜0.05)和乳蛋白(P＜0.05)仍顯著升高，乳糖的含量顯著下降(P＜0.05)。乳汁積滯對乳汁中催乳素的含量無顯著差異(P＞0.10)。與對照組相比，在第48 h到60 h乳汁積滯一側的乳腺乳汁中催乳素含量呈上升趨勢(P=0.10)。與對照組相比，CSN2的mRNA表達量顯著升高(P＜0.05)，PRLRL mRNA的表達量顯著上調(P＜0.05)，而LALBA的mRNA表達量顯著下降(P＜0

11、.05)。
　　通過試驗結果，得出以下結論:
　　1)注射多潘立酮可顯著提升血清催乳素含量，進而提高產奶量;注射多潘立酮聯(lián)合不同擠奶頻率，使乳脂中催乳素受體表達量上升，進而增強乳腺泌乳反應，提高奶牛產奶量和乳脂率。
　　2)注射雌激素后，乳脂中催乳素受體表達量下降，進而導致奶牛奶產量下降。
　　3)注射生長激素可提高奶牛產奶量，并促進催乳素受體、CSN2和LALBA基因的表達。
　　4)注射喹高利特能降低血