電針足陽明經（穴）對大鼠胃黏膜細胞EGFR及其ERK信號轉導機制的影響.pdf

1、目的：以中醫(yī)經絡學說中經脈一臟腑相關理論為指導，觀察電針足陽明經(穴)對大鼠胃黏膜損傷的修復效應、大鼠胃黏膜細胞表皮生長因子受體(EGFR)、細胞外調節(jié)蛋白激酶(ERK)和c-myc表達的影響，從器官、細胞、分子水平多層次系統(tǒng)地探討“足陽明經與胃相關”的物質基礎以及電針足陽明經(穴)參與胃黏膜損傷修復的信號轉導途徑。 方法：采用水浸束縛應激法(WRS)制作應激性大鼠胃黏膜損傷模型，以電針足陽明經“足三里”、“梁門”、“四白”穴為

2、施治因素，按Guth等標準記錄大鼠胃黏膜損傷指數，光鏡下觀察胃黏膜組織形態(tài)學變化；采用免疫組化和逆轉錄聚合酶鏈反應法(RT-PCR)檢測胃黏膜細胞EGFR蛋白和基因的表達；免疫組化和免疫印跡法(Western blot)檢測胃黏膜細胞ERK磷酸化水平：RT-PCR法檢測胃黏膜細胞c-myc基因的表達。 結果：①經造模后，模型組大鼠胃黏膜損傷指數最高，正常組大鼠胃黏膜損傷指數最低，兩組間差異有非常顯著性意義(p<0.01)，說明造

3、模是成功的；電針胃經組和電針膽經組大鼠胃黏膜損傷指數均明顯降低，與模型組比較有非常顯著性差異(P<0.01)，其中電針胃經組大鼠胃黏膜損傷指數降低最為明顯，與電針膽經組比較有非常顯著性差異(P<0.01)； ②在電針足陽明經(穴)后提取的不同稀釋度血清對大鼠胃黏膜細胞EGFR表達差異影響中，1/10胃經血清組大鼠胃黏膜細胞EGFR表達與1/2、1/5和1/20胃經血清組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)，大鼠胃黏膜細胞EGF

4、R表達強弱依次為：1/10胃經血清組>1/20胃經血清組>1/5胃經血清組>1/2胃經血清組；③在與電針足陽明經(穴)或足少陽經(穴)提取的血清孵育后，胃經組和膽經組大鼠胃黏膜細胞EGFR及其基因的表達均明顯增強，與正常組、模型組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)；其中胃經組大鼠胃黏膜細胞EGFR及其基因的表達又最為明顯，與膽經組比較有顯著性差異(P<0.05)； ④在與電針足陽明經(穴)或電針足少陽經(穴)提取的血清孵育后

5、，胃經組和膽經組大鼠胃黏膜細胞ERK磷酸化、c-myc基因表達均明顯升高，與正常組、模型組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)；胃經組大鼠胃黏膜細胞ERK磷酸化、c-myd基因表達升高最為明顯，與膽經組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)；當用PD153035阻斷EGFR后，胃經+PD153035組大鼠胃黏膜細胞ERK磷酸化、c-myc基因表達均明顯降低，與胃經組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)。 結論：①電針足陽明經

6、(穴)可促進大鼠胃黏膜損傷的修復，足陽明經與胃具有相對的特異性聯系； ②電針足陽明經(穴)后提取的不同稀釋度血清皆能使大鼠胃黏膜細胞EGFR蛋白的表達增強，但存在一定的濃度效應相關性，1/10稀釋度血清的效應最為明顯； ③電針足陽明經(穴)后提取的血清可提高大鼠胃黏膜細胞EGFR及其基因的表達，EGFR是足陽明經與胃相關的重要物質基礎； ④電針足陽明經(穴)后提取的血清可提高大鼠胃黏膜細胞ERK磷酸化和c-myc