苜蓿雄性不育系Ms-4雜交改良.pdf

1、本研究采用兩種雜交方式轉(zhuǎn)育雄性不育株，雜交方式一：選取具有優(yōu)良性狀的多個父本與不育系雜交，從F1代中選取農(nóng)藝性狀優(yōu)良的可育株與不育系回交，以不育系為輪回親本進(jìn)行有限回交，對回交早代進(jìn)行選擇；雜交方式二：選取具有優(yōu)良性狀的多個父本與不育系雜交，從F1代中選取不育株與原父本回交，以選取的具有優(yōu)良性狀的父本為輪回親本進(jìn)行回交。通過采用組織培養(yǎng)、細(xì)胞形態(tài)學(xué)、同工酶和分子標(biāo)記等方法和技術(shù)，分析了原不育系雄性不育性及雜交方式一的早代雌蕊育性，初步研

2、究結(jié)果如下： 1、利用多父本與不育系雜交，從F1代中選取農(nóng)藝性狀優(yōu)良的可育株與不育系回交，以不育系為輪回親本進(jìn)行了有限回交，對回交后代進(jìn)行花粉染色反應(yīng)和植株活體鑒定雄性育性，回交一代共得到24個不育株。 2、在苜蓿雄性不育系Ms-4沒有找到保持系之前，組織培養(yǎng)是苜蓿雄性不育系擴(kuò)繁的有效途徑。葉柄可作為誘導(dǎo)愈傷組織的良好外植體，愈傷誘導(dǎo)率為85.6％；附加一定比例的脯胺酸和硫酸銨的培養(yǎng)基有利于體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)，體胚誘導(dǎo)率為9

3、0％，且苜蓿雄性不育系Ms-4體細(xì)胞胚生產(chǎn)性能高。 3、對回交一代24個不育株幾個與雌蕊育性相關(guān)的農(nóng)藝性狀調(diào)查和柱頭、花柱細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征分析結(jié)果表明：回交一代不育株BC<,1>A1-21和BC<,1>A1-22結(jié)實率顯著提高，柱頭膨大較明顯，即乳突細(xì)胞外露面積隆起較大，毛狀體細(xì)胞也相對長且外展；花柱橫切面寬且長，表皮細(xì)胞體積較大，表皮和通道細(xì)胞之間有6-8層薄壁細(xì)胞和多條維管束，通道細(xì)胞排列緊密。兩者雌蕊育性提高。 4、

4、采用聚丙烯酰胺凝膠垂直板電泳技術(shù)，分析了親本與雜交后代不育株不同生育時期的葉片和小花過氧化物酶(POD)、酯酶(EST)同工酶的譜帶差異，結(jié)果表明：雜種F1代POD和EST同工酶譜為雙親的互補(bǔ)型或有雜種特征帶。BC<,1>代POD和EST同工酶譜偏向于輪回親本。 5、采用RAPD技術(shù)，分析了親本及雜交后代基因組DNA遺傳差異，獲得了與苜蓿雄性不育性有一定連鎖關(guān)系的分子標(biāo)記一個，記為MSS126<,438>。利用此標(biāo)記結(jié)合表型鑒定