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文檔簡介
1、西施舌是我國沿海的一種名貴雙殼貝類,具有很高的經(jīng)濟價值,由于海域污染及濫捕等原因,導致資源量受到嚴重破壞。目前,西施舌人工育苗方面雖有較為系統(tǒng)的研究,但仍存在一些問題,幼貝成活率低成為制約人工養(yǎng)殖的主要因素。西施舌群體遺傳多樣性和遺傳分化的研究對于其種質(zhì)資源的保護和良種選育具有重要意義。本研究采用等位酶和AFLP技術對我國沿海西施舌群體進行了遺傳多樣性和遺傳分化的研究,以期為我國西施舌種質(zhì)資源的可持續(xù)利用及保護,加快良種選育提供科學依據(jù)
2、。
1.采用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳對江蘇啟東、福建漳港和廣西北海3個地區(qū)的西施舌野生群體進行等位酶電泳檢測和酶譜分析。獲得7個酶12個位點,其中8個位點為單態(tài)位點,即Aat-1、Me-1、Est-2、Est-4、Acp-1、Acp-2、Amy-1、Amy-2;4個位點為多態(tài)位點,即Sod-1、Mdh-1、Est-1、Est-3。雜合性分析結果顯示,多態(tài)位點中福建漳港群體的Sod-1和Est-1位點、廣西北海群體的Sod-
3、1位點符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);江蘇啟東西施舌群體的多態(tài)位點中所有位點,福建漳港西施舌群體的多態(tài)位點中Mdh-1、Est-3位點,廣西北海西施舌群體的多態(tài)位點中Mdh-1、Est-1、Est-3位點均非常顯著偏離Hardy-Weinberg平衡(P<0.01)。此外,所有多態(tài)位點中,除了江蘇啟東和福建漳港群體的Est-1位點表現(xiàn)出雜合子缺失(F>0)外,各群體中每個位點均表現(xiàn)出雜合子過量(F<0)。
4、 2.等位酶分析西施舌群體遺傳多樣性和遺傳分化結果顯示:3個群體平均每位點等位基因數(shù)目(A)為1.7500;平均每位點有效等位基因數(shù)目(Ae)為1.3939;平均多態(tài)位點百分數(shù)(P)為33.33%;觀察雜合度(H0)在0.2389到0.3083之間,平均值為0.2750;期望雜合度(He)在0.1496到0.2041之間,平均值為0.1765;群體間遺傳分化系數(shù)(GST)為0.0719;群體間的遺傳距離(D)在0.0164到0.03
5、02之間。結合雜合性分析結果,表明我國西施舌種質(zhì)資源狀況處于較好水平。
3.利用擴增片斷長度多態(tài)性(Amplified fragment length polymorphism,AFLP)標記技術對我國沿海山東青島、江蘇啟東、福建漳港和廣西北海4個地區(qū)的野生西施舌群體和福建漳港地區(qū)的1個養(yǎng)殖群體進行了遺傳多樣性和遺傳分化的研究。9對選擇性引物共擴增618個位點。遺傳多樣性結果顯示,西施舌5個群體的平均每位點等位基因數(shù)(A)
6、介于1.3916-1.6036之間,平均為1.5000;平均每位點有效等位基因數(shù)(Ae)介于1.1733-1.2431之間,平均為1.2124;多態(tài)位點百分數(shù)(P)介于39.16%-60.36%之間,平均為49.98%;Shannon氏指數(shù)(I)介于0.1684-0.2354之間,平均為0.2067;Nei's基因多樣性指數(shù)(H)介于0.1073-0.1506之間,平均為0.1320。其中,野生群體遺傳多樣性水平略高于養(yǎng)殖群體。群體間遺
7、傳分化結果顯示,群體間的遺傳分化系數(shù)(GST)介于0.0996-0.4835之間,平均為0.3318;群體間遺傳距離(D)介于0.0365-0.2937之間,平均為0.1858,說明西施舌群體間分化較大。通過對遺傳距離進行聚類分析,山東青島和江蘇啟東的西施舌群體聚為一支,福建漳港和廣西北海的西施舌群體聚為一支,結合遺傳距離(D)及遺傳分化系數(shù)(GST),初步認為兩支已分化達到亞種水平,并在3對引物組合(E-ACA/M-CGT、E-ACT
8、/M-CGT、E-AGA/M-CGT)的擴增結果中找到15個可作為亞種鑒別的AFLP標記。綜合兩項技術分析結果認為,雖然我國西施舌資源受到嚴重破壞,但還未對其遺傳多樣性造成嚴重影響,應及時采取有效的保護措施,以期為西施舌人工養(yǎng)殖保留可靠的種質(zhì)資源。
5.以福建漳港野生西施舌為材料,采用FIASCO(Fast Isolation by AFLP SequencesCOntaining repeats)方法構建西施舌(CA)n
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