固定酶的苯乙烯整體柱微芯片分析系統(tǒng)研究.pdf

1、論文在綜述國(guó)內(nèi)外各種微流控芯片酶反應(yīng)分析系統(tǒng)的基礎(chǔ)上，對(duì)比多種微流控芯片酶反應(yīng)分析系統(tǒng)的特點(diǎn)，選定固定酶的苯乙烯整體柱芯片分析系統(tǒng)，隨后對(duì)該分析系統(tǒng)進(jìn)行了應(yīng)用研究。
　　首先，以苯乙烯功能單體、二乙烯基苯交聯(lián)劑、無(wú)水乙醇致孔劑及偶氮二異丁腈（AIBN）為引發(fā)劑，采用紫外引發(fā)法，制備了反相聚苯乙烯整體柱材料；為了滿足其用于酶固定的要求，采用硫酸磺化改性獲得了陽(yáng)離子聚苯乙烯整體柱材料。用掃描電鏡法、紅外光譜法等手段表征了該材料的形貌結(jié)

2、構(gòu)和特性，并在溶液過(guò)柱流速小于1.5mL/min時(shí)，測(cè)得長(zhǎng)為10mm,直徑為1mm的改性聚苯乙烯整體柱對(duì)L-Tyr樣品的最大吸附量約為3.4mg，柱容量約為0.43mg/mm3，并具有良好的機(jī)械穩(wěn)定性。
　　GOD酶在聚苯乙烯介質(zhì)材料上進(jìn)行固定，在規(guī)格為長(zhǎng)20mm、直徑1mm聚苯乙烯整體柱上，用對(duì)苯醌紫外檢測(cè)的方法測(cè)定，當(dāng)使用的游離酶為10U時(shí)，GOD酶的固定量約為7U，，酶的固定效率可達(dá)70％。
　　在微流控芯片管路中，實(shí)

3、現(xiàn)了聚苯乙烯整體柱的原位聚合和磺化改性，在改性后的聚苯乙烯整體柱上固定了HRP酶，確定了HRP酶在酶濃度5μg/mL和過(guò)柱速度0.2mL/min時(shí)，固定效果良好，以此構(gòu)建了固定酶的苯乙烯整體柱微反應(yīng)芯片分析系統(tǒng)。
　　將該微反應(yīng)芯片分析系統(tǒng)與化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方式結(jié)合，建立了固定酶整體柱微反應(yīng)芯片－化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方法?；瘜W(xué)發(fā)光優(yōu)化實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)樣品過(guò)片流速為0.2mL/min、發(fā)光試劑與樣品的體積比為1：1時(shí)，可以達(dá)到最佳的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)效果。用