一、B型鏈球菌毒力因子的初步晶體學(xué)二、免疫卡控點(diǎn)TIGIT抗原表位和抗體CDR序列的初步研究.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開論述:
　　1.B型鏈球菌毒力因子的初步晶體學(xué)研究
　　B型鏈球菌(GBS)是導(dǎo)致圍產(chǎn)期和新生兒感染的主要病原菌，主要存在于大約25％健康女性的生殖道中。GBS在子宮內(nèi)的上行感染增加了新生兒患肺炎，敗血癥，腦膜炎的風(fēng)險(xiǎn)。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)于GBS的預(yù)防方案采用的主要是抗生素預(yù)防，但是近些年出現(xiàn)的GBS對(duì)抗生素的耐受性引起了對(duì)GBS感染治療的關(guān)注。目前還沒有有效的措施預(yù)防GBS的上行感染，因此新型疫苗和抗

2、菌藥物的開發(fā)已經(jīng)迫在眉睫，而針對(duì)GBS毒力蛋白或其合成途徑設(shè)計(jì)抑制性藥物是一種較為有效且可行的方案。
　　GBS基因組測(cè)序已經(jīng)完成，結(jié)合文獻(xiàn)的報(bào)道，我們篩選了十種與GBS毒力作用相關(guān)的蛋白進(jìn)行結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究，這十種蛋白包括負(fù)責(zé)合成GBSβ-haemolysis的cyl操縱子上的cylA、cylB和cylE，還有一些與GBS毒性相關(guān)的表面蛋白，這些表面蛋白對(duì)GBS的生長(zhǎng)和毒性具有不可或缺的作用。我們?cè)噲D利用結(jié)構(gòu)生物學(xué)的手段探究這些蛋

3、白發(fā)揮毒力作用的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，希望通過結(jié)構(gòu)分析找到這些蛋白上的潛在靶向藥物作用位點(diǎn)，為新型抗菌藥物的開發(fā)與設(shè)計(jì)提供理論依據(jù)。
　　于是，我們將這十種毒力蛋白分別進(jìn)行了分子克隆、大量表達(dá)與純化，并對(duì)純化得到的高純度蛋白進(jìn)行大規(guī)模的晶體篩選。最后，有兩種表面蛋白收集了衍射數(shù)據(jù)，通過對(duì)衍射數(shù)據(jù)的處理獲得了初步的結(jié)構(gòu)信息。
　　2.免疫卡控點(diǎn)TIGIT抗原表位和抗體CDR序列的初步研究
　　近年來，針對(duì)免疫細(xì)胞共抑制性受體的免疫卡

4、控點(diǎn)治療在腫瘤免疫治療中取得了巨大進(jìn)展。免疫卡控點(diǎn)治療與傳統(tǒng)治療方法的區(qū)別在于，它不是以腫瘤細(xì)胞作為靶點(diǎn)，而是以免疫細(xì)胞表面的抑制性受體為靶點(diǎn)，通過抑制這種受體來激活免疫細(xì)胞抗腫瘤活性，研究最多的這種抑制性受體是CTLA4，PD-1，目前針對(duì)它們的單抗藥物已經(jīng)在臨床實(shí)驗(yàn)中取得了初步成功。但是這些抗體藥物還具有局限性和副作用，所以發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證新的共抑制性受體成為一個(gè)全球競(jìng)爭(zhēng)性的熱點(diǎn)。
　　TIGIT是2009年被發(fā)現(xiàn)的位于NK細(xì)胞和T

5、細(xì)胞表面的共抑制性受體，目前研究表明阻斷TIGIT的單克隆抗體，在動(dòng)物模型中具有很好的抗癌效果，所以TIGIT是一個(gè)很具潛力的免疫治療新靶點(diǎn)，但國(guó)內(nèi)外還沒有針對(duì)TIGIT受體的抗體藥物上市，因此亟須開展高效特異性TIGIT單克隆抗體的研發(fā)。
　　該研究課題主要圍繞TIGIT單克隆抗體與TIGIT復(fù)合物結(jié)構(gòu)展開，希望能通過解析復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)來發(fā)現(xiàn)TIGIT單抗高變識(shí)別區(qū)(CDR)序列和TIGIT靶點(diǎn)的抗原表位，然后再基于結(jié)構(gòu)改造獲得