川木通及常用習用品的生藥學研究.pdf

1、目的:川木通系毛茛科植物小木通Clematis armandii Franch.或繡球藤Clematismontana Buch.-Ham.的干燥藤莖。具有利尿通淋，清心除煩，通經(jīng)下乳的作用。目前市場混用嚴重，飲片鑒別困難，用藥安全性及藥效難以保障，本研究擬從生藥性狀、顯微、薄層定性、DNA條形碼和HPLC特征圖譜基因化學雙指紋研究，形成綜合研究體系。對市場占有率較高的川木通混品粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤進行初步的化學成分及藥效研究，為川木通

2、鑒定及替代品使用提供依據(jù)。
　　方法:本次研究采用石蠟包埋技術(shù)和番紅固綠染色法對小木通、繡球藤、粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤的莖進行了顯微鑒定，對四種藥材進行了粉末對比研究;以對照藥材為對照建立了川木通TLC鑒別方法。進行了川木通藥材的水分、總灰分以及浸出物等檢查項測定;提取生藥和飲片總DNA，對DNA的ITS2序列進行擴增測序，對DNA序列進行比較分析;采用HPLC法建立了川木通的HPLC特征圖譜，利用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”

3、對收集到的樣品與小木通和繡球藤進行了相似度比對;最后為藥典法定品種與市場習用品種之間藥效區(qū)別，初步進行了藥典品種小木通、繡球藤和非藥典品種粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤的利尿效果比較研究
　　結(jié)果:從顯微結(jié)果看，初生射線:小木通17條，其它均為12條;繡球藤的韌皮部的厚壁細胞環(huán)帶不連續(xù)成環(huán)，在髓射線處間斷;粗齒鐵線蓮呈現(xiàn)不明顯六凹槽，導管孔粗大;小蓑衣藤橫截面花瓣狀;粉末結(jié)果顯示，小木通、繡球藤、粗齒鐵線蓮以及小蓑衣藤在韌皮射線細胞、石細胞

4、和導管的形態(tài)及大小上有著不同程度的差別?；贗TS2的DNA條形碼結(jié)果顯示，川木通飲片主要以粗齒鐵線蓮為主，小木通使用較少，未發(fā)現(xiàn)繡球藤;通過NJ樹看出繡球藤、粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤三者親緣關系相近。通過HPLC特征圖譜比對，粗齒鐵線蓮、小蓑衣藤和繡球藤在化學成分上相似度非常高;通過利尿效果研究發(fā)現(xiàn)粗齒鐵線蓮與川木通一樣均有明顯的利尿效果。
　　結(jié)論:
　　1、建立了一個川木通較為系統(tǒng)鑒定的方法，能準確有效地將川木通與鐵線蓮屬