microRNA相關(guān)基因遺傳多態(tài)性與冠心病臨床關(guān)聯(lián)及預(yù)后研究.pdf

1、本文對microRNA相關(guān)基因遺傳多態(tài)性與冠心病臨床關(guān)聯(lián)及預(yù)后進(jìn)行了研究。本研究分為三個部分：
　　第一部分：microRNA相關(guān)遺傳多態(tài)性與血壓、血糖、血脂等臨床特征相關(guān)性研究。
　　目的：大量研究顯示，miRNA相關(guān)基因多態(tài)性不僅與復(fù)雜疾病的易感性密切相關(guān)，同時也影響血脂等臨床特征。本研究目的是檢驗6個 miRNA相關(guān)基因多態(tài)（miR-149rs71428439、miR-146a rs2910164、miR-499 rs

2、3746444、miR-423 rs6505162、miR-4513rs2168518和FABP2 rs11724758）與中國漢族人群冠心?。╟oronaryartery disease，CAD）臨床特征的關(guān)聯(lián)性。
　　方法：利用連接酶檢測反應(yīng)（ligase detection reaction，LDR）-PCR技術(shù)分型1004例冠心病6個SNP位點(diǎn)（miR-149rs71428439、miR-146a rs2910164、mi

3、R-499 rs3746444、miR-4513 rs2168518、miR-423 rs6505162和FABP2rs11724758）的基因分型，統(tǒng)計分析SNP與冠心病患者的血壓、血脂、血糖等臨床特征的關(guān)聯(lián)。
　　結(jié)果：除FABP2 rs11724758位點(diǎn)外（p<0.05），其余5個SNP位點(diǎn)的基因型分布均符合HWE（p>0.05），因此將不符合HWE的FABP2rs11724758剔除。統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，miR-4513 rs

4、2168518與血壓、甘油三酯、總膽固醇、空腹血糖水平及糖尿病合并癥相關(guān)（p<0.05）。miR-499 rs3746444及miR-423 rs6505162分別與血壓、高密度脂蛋白水平關(guān)聯(lián)（p<0.05）。
　　結(jié)論：miR-4513 rs2168518、miR-499 rs3746444及miR-423 rs6505162與冠心病患者血壓、血脂、血糖等多個臨床特征密切相關(guān)。
　　第二部分：microRNA相關(guān)基因多態(tài)性

5、與冠心病的預(yù)后研究。
　　目的：miRNA基因上的遺傳變異可能會影響miRNA功能，進(jìn)而導(dǎo)致疾病，并影響其預(yù)后。本研究的目的是檢測 miRNA基因多態(tài)性與中國漢族冠心病患者的預(yù)后關(guān)聯(lián)。
　　方法：采用前瞻性研究的方法，對2009-2014年1004名冠心病患者進(jìn)行隨訪。本次隨訪研究以首次主要心血管不良事件（major cardiovascular event）[心肌梗塞（myocardial infarction，MI）、中

6、風(fēng)、心力衰竭、血管再通（recanalization）、冠狀動脈旁路移植術(shù)（coronary artery bypass grafting）、心臟驟停復(fù)蘇（resuscitated cardiac arrest）和死于心血管病]為隊列研究的主要研究終點(diǎn)，次要研究終點(diǎn)為任何原因死亡。截至2014年共記錄主要心血管不良事件244例（24.3％），平均隨訪4.86年。利用Kaplan-Meier法和log-rank檢驗進(jìn)行生存分析，Cox回歸

7、模型分析miRNA相關(guān)基因多態(tài)性對冠心病患者預(yù)后的影響。
　　結(jié)果：生存分析顯示miR-499 rs3746444和miR-4513 rs2168518與冠心病無事件生存期顯著相關(guān)（p<0.05）。miR-499 rs3746444的GG基因型在顯性遺傳模型（校正HR=1.913，95%CI：1.162-3.152，p=0.011）和隱性遺傳模型（校正HR=1.954，95%CI：1.197-3.192，p=007）下，均與冠心病

8、患者較短的無病生存時間顯著相關(guān)。miR-4513 rs2168518在共顯性遺傳模型（CT vs TT，校正HR=1.345，95%CI：1.022-1.770，p=0.034; TT vs CC，校正HR=1.714，95%CI：1.077-2.729，p=0.023）、顯性遺傳模型（校正HR=1.401，95%CI：1.079-1.819，p=0.011）和加性遺傳模型（校正HR=1.323，95%CI：1.084-1.615，p=

9、0.006）下，與升高的主要心血管不良事件風(fēng)險顯著相關(guān)。此外，miR-4513 rs2168518是冠心病總生存時間的獨(dú)立預(yù)后生物標(biāo)志物（顯性模式，校正HR=2.307，95%CI：1.486-3.584，p<0.001;隱性模式，校正HR=2.121，95%CI：1.126-3.955，p=0.020;加性模式，校正HR=1.855，95%CI：1.367-2.517，p<0.001）。miR-149 rs71428439GG基因型與

10、冠心病患者較短的總生存時間顯著相關(guān)（校正HR=1.821，95%CI：1.008-3.290，p=0.047）。
　　結(jié)論：miR-4513 rs2168518、miR-499 rs3746444可能是冠心病預(yù)后評估的風(fēng)險因子。
　　第三部分：冠心病患者血清microRNA表達(dá)分析。
　　目的：microRNA(miRNA)是一類可負(fù)性調(diào)控基因表達(dá)的非編碼小 RNA，在冠心病等復(fù)雜疾病的發(fā)生、發(fā)展中扮演著重要的角色。本

11、研究目的是觀察冠心病血清中異常表達(dá)的miRNA及其表達(dá)水平變化趨勢。
　　方法：應(yīng)用實(shí)時熒光定量PCR（quantitative reverse transcriptase PCR，qRT-PCR）技術(shù)檢測86例對照組及86例冠心病血清樣本中miR-149、miR-146a、miR-499、miR-4513和miR-423共5個miRNA前體（pre-miRNA）及成熟體的表達(dá)情況，篩選經(jīng)表達(dá)分析鑒定后有統(tǒng)計學(xué)表達(dá)差異的miRNA

12、。
　　結(jié)果：qRT-PCR結(jié)果表明，與正常對照組樣本相比，候選的5個pre-miRNA中，血清pre-miR-146a和pre-miR-499表達(dá)水平顯著發(fā)生改變，其中 pre-miR-146a表達(dá)上調(diào)（fold change=2.75，p=0.025），pre-miR-499表達(dá)下調(diào)（fold change=2.14，p=0.031），而pre-miR-149、pre-miR-4513和pre-miR-423在冠心病組和對照組

13、中的血清表達(dá)水平未見明顯差異（p均>0.05）。并且，血清miR-146a在冠心病患者中顯著上調(diào)（fold change=1.96，p=0.039），而血清miR-499表達(dá)顯著下調(diào)（fold change=2.02，p=0.042）。血清miR-149、miR-4513和miR-423表達(dá)水平在對照組和冠心病組之間無明顯差異（p均>0.05）。
　　結(jié)論：血清pre-miR-146a、pre-miR-499、miR-146a和m